课程名称：兽医微生物学及免疫学实验   英文名称：Veterinary Microbiology and Immunology Experiment

课程总学时：32                           实验学时：32

课程总学分：1

适用专业：动物药学

一、课程性质与任务(100～300字)

兽医微生物学及免疫学实验是动物药学专业的一门专业必修课，其配合兽医微生物学及免疫学的理论课教学，注重兽医微生物学和免疫学基本的实验方法和技能的培养，并紧密结合临床实际运用。实验内容包括微生物学基本实验操作，微生物的分离、培养及鉴定方法，免疫学基本实验操作，微生物学检验诊断的系统方法。通过实验教学和操作使学生加深对理论知识的理解与运用，掌握兽医临床诊断中常用的微生物和免疫学基本实验手段及技能，培养学生正确记录、处理和分析实验数据，养成实事求是、严肃认真的科学作风和细致整洁的实验习惯，为今后从事兽医学和免疫学相关工作打下良好的基础。

二、教学目的与要求(600字以内)

1、系统练习和掌握兽医微生物学的基本实验室操作技能；

2、掌握微生物的分离、培养及鉴定方法；

3、掌握兽医免疫学的基本实验操作技能；

3、能够综合运用微生物学和免疫学实验方法对特定传染病的诊断进行实验设计。

三、实验项目设置

（一）实验一：细菌抹片的制备、染色及镜检，培养基的制备

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：

（1）掌握细菌抹片的制备方法和几种常用的染色方法。

（2）细菌的形态的显微镜观察.

（3）熟悉一般培养基制备的原则和要求。

4、实验内容：

（1）细菌抹片的制备。

（2）几种常用的染色方法。

（3）油镜的使用。

（4）普通肉汤培养基和普通琼脂培养基的制作。

5、实验要求

（1）认识革兰氏染色和抗酸染色的反应特性。

（2）熟悉一般培养基制备的过程。

（3）通过细菌标本片观察，熟悉光学显微镜的使用。

6、实验仪器设备：酒精灯、光学显微镜、高压锅、培养箱。

（二）实验二：细菌分离培养及移植、环境中微生物检验

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：

（1）掌握细菌分离培养的基本要领和方法。

（2）了解自然界中微生物的分布及其重要意义。

4、实验内容：

需氧菌：

（1）划线分离培养法。

（2）纯培养的获得与移植法。

（3）肉汤增菌培养。

（4）穿刺培养。

（5）倾注培养法。

厌氧菌：

（1）焦性没食子酸法。

（2）玻罐或干燥器法。

5、实验要求：掌握需氧菌和厌氧菌培养的原理及其方法。

6、实验仪器设备：酒精灯、显微镜、高压锅、培养箱。

（三）实验三：细菌生化实验及理化因素对细菌的影响

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：

掌握细菌鉴定中常用生化实验的原理和方法，掌握圆纸片扩散法检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判定方法。

4、实验内容：

（1）各类细菌生化试验。

（2）圆纸片扩散试验。

（3）最低抑菌浓度试验。

5、实验要求：

（1）了解细菌生化试验在细菌鉴定及诊断中的作用。

（2）了解最低抑菌浓度试验的原理和方法。

（3）了解药敏试验在实际生产中的重要意义。

6、实验仪器设备：酒精灯、显微镜、紫外灯、培养箱。

（四）实验四：实验动物接种、剖检

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：学习实验动物的接种、采血以及剖检的方法。

4、实验内容：

（1）实验动物接种法。

（2）实验动物采血法。

（3）实验动物的尸体剖检法。

5、实验要求：掌握动物实验的基本操作和注意事项。

6、实验仪器设备：注射器、解剖台、高压锅、培养箱。

（五）实验五：直接凝集和间接凝集试验

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：

（1）熟悉玻板凝集试验和试管凝集试验的操作技术。

（2）熟悉以微量反应板进行正向间接血凝试验的操作技术。

4、实验内容：

（1）玻板凝集试验和试管凝集试验。

（2）正向间接血凝试验。

5、实验要求：

（1）掌握直接凝集的试验方法及结果判定。

（2）掌握间接凝集的试验方法及结果判定。

6、实验仪器设备：培养箱、振荡器。

（六）实验六：琼脂免疫扩散实验、酶联免疫吸附（ELISA）实验

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：

（1）掌握双向双扩散试验的原理、操作方法及结果的判定。

（2）掌握酶联免疫吸附试验的基本操作步骤。

4、实验内容：

（1）抗原抗体的琼脂扩散实验。

（2）间接夹心ELISA。

5、实验要求：掌握琼脂免疫扩散实验和ELISA实验的操作方法和结果判定。

6、实验仪器设备：冰箱、培养箱、酶标仪。

（七）实验七：免疫荧光抗体实验

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：掌握荧光抗体染色诊断猪瘟的基本操作步骤。

4、实验内容：

（1）细胞的培养和固定。

（2）荧光抗体染色。

（3）荧光显微镜的观察。

5、实验要求：掌握荧光抗体染色的操作及荧光显微镜的使用方法。

6、实验仪器设备：荧光显微镜、普通培养箱、二氧化碳培养箱。

（八）实验八：新城疫病毒的血凝及血凝抑制试验

1、实验类型：验证

2、实验学时数：4

3、实验目的：掌握HA和HI的基本操作技术。

4、实验内容：

（1）血球凝集试验（HA）

（2）血细胞凝集抑制试验（HI）

5、实验要求：掌握HA和HI的操作方法和实验结果的判断。

6、实验仪器设备：微量移液器、培养箱、微量振荡器。

四、考核方式与方法

五、实验指导教材与参考资料

1. 教材：

姚火春主编，《兽医微生物学实验指导》，中国农业出版社，2009年1月第二版

郭鑫主编，《动物免疫学实验教程》，中国农业大学出版社，2007年3月第一版

2. 参考资料：

胡桂学，陈金顶，彭远义主编，《兽医微生物学实验教程》，中国农业大学出版社，2015年1月第二版

陆承平主编，《兽医微生物学》，中国农业出版社，2013年1月第五版

崔治中主编，《兽医免疫学》，中国农业出版社，2015年1月第二版

     （撰写人：罗永文  审核人：郭慧霞  ）